10.3321/j.issn:1001-5213.2009.15.016
高效液相色谱法检测体外酶促反应体系中底物3-脱氧葡萄糖醛酮
目的:建立体外酶促反应体系中底物3-脱氧葡萄糖醛酮(3-deoxyglucosone,3-DG)的高效液相色谱检测方法.方法:应用2,3-二氨基萘柱前衍生,采用GR色谱柱(4.6 mm×25 mm,5 μm)为固定相,50 mmol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 7.4)-甲醇-乙腈(70:5:25)为流动相,检测波长为Ex/Em:271/503 nm的条件,测定体外酶促反应体系中底物3-DG的含量.结果:3-DG峰呈尖峰,分离较好,理论塔板数为6 459;在1~5 mg·L-1范围内线性关系良好(Y=332.40X+34.50,r=0.999 2);平均加样回收率为77.17%,RSD为8.98%(n=5).结论:该方法可初步应用于体外酶促反应体系中底物3-DG的含量测定,并以3-DG的消耗量来反映体系中酶的活性.
高效液相色谱法、酶促反应、3-脱氧葡萄糖醛酮
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R927.2(药典、药方集(处方集)、药物鉴定)
江苏省中医药管理局科研课题2003-2004;苏州市高层次人才资助项目2004-33
2009-09-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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