芪黄益气摄血方调控PI3K/AKT/mTOR信号通路和自噬治疗免疫性血小板减少症的作用机制
目的:基于磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)自噬信号通路探讨芪黄益气摄血方治疗免疫性血小板减少症(ITP)模型小鼠的作用机制.方法:50只BALB/c小鼠随机分为5组,分别为正常组,模型组,芪黄益气摄血方高、低剂量组和强的松组,每组10只.采用豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)腹腔注射方法,建立ITP小鼠模型;注射APS后的第8天,各组分别灌胃给药,连续14d.检测外周血血小板(PLT)计数和血红蛋白(Hb)浓度变化,Elisa法检测血清血小板生成素(TPO)水平;分离脾脏、胸腺组织,称重,计算脾脏、胸腺指数;取胸骨做骨髓涂片,显微镜下进行骨髓巨核细胞分类;qRT-PCR法检测脾脏PI3K、AKT、mTOR、微管相关蛋白轻链3(LC3)、自噬关键分子酵母Atg6同素物(Beclin1)、P62 mRNA表达水平;Western Blot法检测脾脏p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ、Beclin1、P62蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组小鼠外周血PLT计数、Hb及TPO水平显著下降(P＜0.05,P＜0.01),脾脏和胸腺指数显著升高(P＜0.01),骨髓产板巨核细胞数显著减少(P＜0.01);与模型组比较,芪黄益气摄血方高、低剂量组及强的松组PLT计数、TPO水平显著升高(P＜0.01),脾脏指数和胸腺指数显著降低(P＜0.05,P＜0.01),骨髓产板巨核细胞数显著增加(P＜0.01),仅芪黄益气摄血方高剂量组Hb水平显著增加(P＜0.05);与低剂量组比较,高剂量组PLT计数显著升高(P＜0.05).qRT-PCR和Western Blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠脾脏PI3K、AKT、mTOR、P62 mRNA表达水平显著下调(P＜0.05,P＜0.01),p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、P62蛋白表达水平亦显著下调(P＜0.01),而LC3、Beclin1 mRNA和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ、Beclin1蛋白表达水平均显著上调(P＜0.01);与模型组比较,芪黄益气摄血方高、低剂量组及强的松组可显著上调脾脏PI3K、AKT、mTOR、P62 mRNA表达水平(P＜0.05,P＜0.01),显著上调p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、P62蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01),显著下调LC3、Beclin1 mRNA和LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ、Beclin1蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:芪黄益气摄血方可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制自噬,调节ITP免疫失耐受,从而发挥治疗作用.
免疫性血小板减少症、芪黄益气摄血方、PI3K/AKT/mTOR信号通路、自噬
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R737.9;R587.1;R34
国家自然科学基金;齐鲁卫生与健康杰出青年人才资助项目;中央本级重大增减支项目;全国名老中医药专家刘持年传承工作室建设项目;山东省中医药科技面上项目
2022-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
5627-5633
