派特灵对Ect1/E6E7细胞增殖迁移能力及Wnt/β-catenin通路的影响
目的:研究派特灵对Ect1/E6E7细胞增殖迁移能力及Wnt/β-catenin通路的影响.方法:以含10％胎牛血清的DMEM培养基培养细胞,将细胞分为对照组和派特灵组(3.906、2.604、1.953、1.563、1.302、1.116、0.977g/L),加药干预24h,镜下观察细胞形态变化,并采用MTT法检测细胞活力,计算派特灵对Ect1/E6E7细胞的半数抑制浓度(IC50);将Ect1/E6E7细胞分为对照组,顺铂组(0.01g/L),抑制剂组,派特灵高、中、低浓度组(2.974、1.487、0.991g/L),分别用CCK-8、划痕、Transwell方法检测派特灵对Ect1/E6E7细胞增殖迁移能力的影响;以及用免疫组化、Western Blotting方法检测各组细胞Wnt4、β-catenin蛋白的表达.结果:对照组细胞呈扁平多边形,顺铂组、派特灵各浓度组细胞皱缩、体积变小、数量减少,以派特灵高浓度组最明显;MTT实验显示,派特灵对Ect1/E6E7细胞增殖有明显抑制作用,IC50为2.974g/L;CCK-8法结果示顺铂组和派特灵高浓度组对Ect1/E6E7细胞增殖有较强抑制作用;划痕实验示派特灵高浓度组、顺铂组药物干预12h后,划痕面积均显著高于对照组(P＜0.01,P＜0.05),派特灵高浓度组划痕面积高于派特灵低浓度组(P＜0.05);药物干预24h后,派特灵高浓度组、顺铂组划痕面积显著高于对照组和派特灵中、低浓度组(P＜0.01);Transwell迁移实验示顺铂组、派特灵各浓度组细胞迁移数量显著低于对照组(P＜0.01),顺铂组、派特灵高浓度组细胞迁移数量显著低于派特灵中、低浓度组(P＜0.01);Western Blotting实验结果显示,与抑制剂XAV939组比较,对照组、顺铂组、派特灵各浓度组Wnt4蛋白表达量显著升高(P＜0.01);派特灵高、中浓度组Wnt4蛋白表达量比派特灵低浓度组显著降低(P＜0.01);Western Blotting、免疫组化实验结果显示与对照组比较,顺铂组、抑制剂组、派特灵各浓度组β-catenin蛋白表达量显著减少(P＜0.01);与抑制剂XAV939组比较,顺铂组、派特灵各浓度组β-catenin蛋白表达量显著增加(P＜0.01).结论:派特灵可抑制Ect1/E6E7细胞增殖迁移能力且呈一定量效关系,可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路发挥作用.
派特灵、Ect1/E6E7细胞、划痕实验、Transwell、Wnt/β-catenin
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派特灵合作开发项目No.2180071720049
2021-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
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