大黄素通过逆转Notch信号通路抑制雄激素非依赖前列腺癌细胞PC3增殖和诱导凋亡研究
目的:研究大黄素(EM)对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨EM是否通过Notch信号通路达到抗肿瘤作用.方法:MTT比色法检测10、20、40、60、80μmol/L浓度EM作用于PC3细胞12、24、36、48、72、96h后细胞活性;24h后流式细胞仪测定细胞周期及凋亡的变化,透射电镜观察细胞超微结构变化;RT-PCR和Western Blot检测PC3细胞内Notch1、Jagged1、VEGF和bFGF mRNA和蛋白的表达;激光共聚焦显微镜免疫荧光分析法评价Notch1蛋白的表达水平和亚细胞定位分布.结果:EM能显著抑制PC3细胞的生长,呈剂量与时间依赖性,不同浓度EM组之间及不同时间组之间差异均有统计学意义(P＜0.01);PC3细胞出现有EM剂量依赖性G2/M期阻滞(P＜0.01),且各浓度组凋亡细胞比例均显著高于空白对照组(P＜0.01),差异有统计学意义;EM作用24h后PC3细胞出现凋亡形态学改变;PC3细胞内Notch1 mRNA和蛋白表达均上升,Jagged1、VEGF、bFGF mRNA和蛋白的表达呈剂量依赖性降低;激光共聚焦检测结果显示PC3细胞中Notch1不仅有胞膜、胞浆定位,胞核也有少量表达,随EM浓度升高胞核内表达增加.结论:EM能显著抑制PC3细胞的生长,促进凋亡;并促进其G2/M期阻滞;Notch1的表达和核易位激活引起VEGF、bFGF表达明显降低,可能是EM抑制前列腺癌细胞生长转移的机制之一.
大黄素、前列腺癌细胞、PC3细胞、凋亡、Notch1
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浙江省自然科学基金Y2111329;浙江省医药卫生科技计划2011KYB066;浙江省中医药卫生科技计划2011ZB099;杭州市医疗卫生科研项目20110833B05;浙江省医学会临床科研资金项目2012ZYC-A35;Zhejiang Provincial Natural Science FoundationY2111329;Science and Technology Program of Medicine and Health of Zhejiang Province2011KYB066;Science and Technology Program of Traditional Chinese Medicine and Health of Zhejiang Province2011ZB099;Scientific Research Foundation Plan for Medicine and Health of Hangzhou20110833B05;Clinical Scientific Research Foundation Plan of Zhejiang Provincial Medical Association2012ZYC-A35
2014-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
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