毒热平注射液对甲型流感病毒H3N2体外感染细胞中TLR7信号通路的影响
目的:观察甲型流感病毒H3N2感染人胚肾上皮细胞(HEK-293T)细胞及人肺腺癌上皮细胞(A549)细胞后,对NF-κB转录活性以及TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-β mRNA的影响,探讨H3N2对体外感染细胞中TLR7信号通路的影响及清热解毒中药毒热平注射液的干预作用.方法:采用MTT法体外检测各组药物对293T、A549细胞增殖的影响;H3N2感染293T细胞后,利用双荧光素酶报告系统,以利巴韦林、清开灵注射液为药物对照,检测毒热平注射液各浓度组细胞中NF-κB相对荧光素酶活性;H3N2感染A549细胞后,RT-PCR方法检测各组细胞中TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-β mRNA水平.结果:MTT结果显示,毒热平、利巴韦林、清开灵注射液各浓度不影响细胞正常增殖(P＞0.05).报告基因结果显示,与细胞对照组相比,H3N2感染组细胞NF-κB转录活性显著增高(P＜0.01);与H3N2感染组相比,利巴韦林0.5μg/mL,清开灵1/128稀释组,毒热平1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL组均可不同程度下调NF-κB的转录活性(P＜0.01).RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H3N2病毒组的TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-β mRNA表达明显增高(P＜0.01);与H3N2感染组相比,一定浓度的药物组TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-β mRNA表达量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:流感病毒H3N2攻击细胞可以显著上调TLR7受体的表达和核因子NF-κB转录活性,并引起下游相关靶基因的表达增多.毒热平注射液可以下调H3N2引起的TLR7信号通路的激活,抑制NF-κB的转录活性,减少下游炎性因子TNF-α、IL-8、IFN-β的表达.
H3N2、毒热平注射液、NF-κB、双荧光素酶报告系统、TLR7、信号转导
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R2(中国医学)
国家自然科学基金30772872
2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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