10.13459/j.cnki.cjap.2016.06.019
TLR4/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用
目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用及其机制,为神经退行性疾病(ND)的发病机制与防治研究提供新的实验依据.方法:采用体外培养7d的新生大鼠海马神经元,免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度.用TLR4配体脂多糖(LPS)或TLR4抗体预处理海马神经元,以激活或阻断TLR4的作用.实验1设正常对照组、LPS组及TLR4抗体+LPS组;免疫荧光法检测P-P38,P-JNK的表达.实验2分为6组:正常对照组,LPS组,TLR4抗体+LPS组,SB202190(抑制P38)+LPS组,SP600125(抑制JNK)+ LPS组,PD98059(抑制ERK)+ LPS组;分别用TLR4抗体、P38、JNK及ERK的抑制剂预处理海马神经元后再给以LPS刺激24h,Western blot法检测Bcl-2,Bax,Active-caspase-3的表达变化;流式细胞术检测海马神经元凋亡率.结果:LPS组海马神经元P-P38、P-JNK的表达明显高于正常对照组(P＜0.01),TLR4抗体+LPS组P-P38,P-JNK表达显著低于LPS组(P＜0.01).与正常对照组相比,LPS组海马神经元Bcl-2/Bax表达减少、Active-caspase-3表达增加,海马神经元凋亡率增加(P＜0.01).而TLR4抗体+LPS组、SB202190+ LPS组、SP600125+LPS组Bcl-2/Bax显著高于LPS组、Active caspase-3显著低于LPS组(P＜0.01),海马神经元凋亡率显著低于LPS组(P＜0.05,P＜0.01).PD98059+ LPS组与LPS组海马神经元凋亡率无明显差异.结论:①海马神经元中有TLR4介导的P38/JNK信号通路.②海马神经元TLR4激活后,P-P38、P-JNK表达增加,使Bcl-2/Bax的比例降低和Active-caspase-3表达增加,从而促进海马神经元的凋亡.海马神经元凋亡过程中有TLR4介导的P38/JNK信号通路的参与.
海马神经元、TLR4/P38/JNK信号通路、Bcl-2/ Bax、凋亡蛋白酶-3、细胞凋亡、脂多糖
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R3(基础医学)
南通市应用研究科技计划项目BK2013007
2017-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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