10.13459/j.cnki.cjap.2016.01.004
Nrf2/ARE通路相关因子在脂肪变性HepG2细胞中的表达及其意义
目的:探讨建立一种新型的脂肪变性人肝癌细胞(HepG2)模型,观察核因子E2相关因子2(Nr)/抗氧化反应元件(ARE)通路相关因子在脂肪变性HepG2细胞中的表达及其意义.方法:HepG2细胞给予含25%的胎牛血清、0.1%医用脂肪乳和0.1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)的DMEM培养基分阶段诱导后,建立脂肪变性HepG2细胞模型,并设置对照组.模型成功后,以油红O染色观察细胞内脂滴形成状况,并用全自动生化仪检测细胞内甘油三酯(TG)含量;采用流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)的含量,采用生物试剂盒检测细胞内一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量及活性的变化;运用Western blot法检测各组细胞Nrf2、血红素氧化酶-1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白的表达.结果:与对照组比较,模型组油红O染色可见细胞内橘红色脂滴大量形成,TG、ROS、NO、MDA含量水平明显增高(P<0.05,P<0.01),SOD、GSH--Px活性明显下降(P<0.01),Nrf2、HOd和NQO1蛋白表达均显著增高(P<0.05,P<0.01).结论:本模型可以成功诱导HepG2细胞发生脂肪变性和氧化应激损伤状态;Nrf2/ARE通路下游相关因子发生激活可能与脂肪变性HepG2细胞氧化应激的过度反应有关.
HepG2细胞、脂肪变性、Nrf2/ARE通路、氧化应激
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R34(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金资助项目81302878,81273617;中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金cfhpc20132184;暨南大学第一临床医学院科研培育专项基金2014205
2016-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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