神经胶质瘤U251细胞氧化损伤中自噬和凋亡过程的时间顺序
目的:探讨过氧化氢(H2O2)诱导神经胶质瘤U251细胞损伤中自噬和凋亡发生的时间顺序.方法:实验分为4组:正常对照组、1mmol/LH2O2作用(6h、12 h、24h)组.应用MTT法检测H2O2对神经胶质U251细胞生存率的影响;MDC染色检测自噬空泡的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率变化.Western blot检测Beclin 1和胞浆cyt c 蛋白的表达.结果:与对照组相比,1 mmol/L H2O2作用下,U251细胞存活率明显降低,并呈时间依赖性.与对照组相比,1 mmol/L H2O2作用后,6h时U251细胞自噬空泡明显增加,自噬相关蛋白Beclin 1表达明显增加,12 h、24h 细胞自噬水平逐渐增强;而6h时未见细胞凋亡率明显变化及cyt c由线粒体向胞浆的释放,12 h、24h时细胞凋亡率明显增加,胞浆中cyt c蛋白表达明显增强(P<0.05).结论:氧化损伤能够诱导神经胶质瘤U251细胞发生自噬和凋亡,并且自噬发生于凋亡之前.
过氧化氢、U251细胞、自噬、凋亡
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R73-3(肿瘤学)
温州医学院科研启动基金资助项目QTJ09014;浙江省教育厅课题Y200906732
2016-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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