重组ProTα诱导肝癌细胞自噬的作用及机制

摘要：

目的 通过体内外实验探讨ProTα 对肝癌细胞自噬和增殖的影响及机制.方法 以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,给予不同剂量的ProTα和干扰素-γ(IFN-γ)处理,CCK-8法检测ProTα和IFN-γ 对HepG2细胞增殖的影响;Western blot法检测HepG2自噬相关LC3B蛋白表达;取C57BL/6雄性小鼠50只,左侧腋下注射H22细胞株复制H22肝癌实体瘤模型,筛选肿瘤直径>2 mm的小鼠40只,随机数表法分为四组,每组各10只,分别为对照组、ProTα组、奥沙利铂组、ProTα+奥沙利铂组.干预组小鼠奥沙利铂腹腔注射2周,对照组小鼠给予等体积生理盐水注射.2周后处死小鼠,取出肿瘤组织,测定小鼠体重、瘤质量并计算抑瘤率;Western blot法检测肿瘤组织中自噬相关LC3B、P62蛋白及p-mTOR蛋白表达水平.结果 CCK-8检测显示,与对照组比较,不同浓度的ProTα 对HepG2细胞存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05);使用100 ng/ml IFN-γ 处理HepG2细胞24、48 h的存活率均明显降低,分别为61.03％,52.16％,抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.01);自噬标记物LC3B蛋白水平显著增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).动物实验表明,ProTα 可明显降低H22实体瘤小鼠的瘤质量系数,抑瘤率达34.7％;ProTα+奥沙利铂组抑瘤率明显高于ProTα 组(P<0.05);与对照组及奥沙利铂组比较,ProTα 和ProTα+奥沙利铂组胸腺指数较高(P<0.05);与对照组比较,ProTα 组、奥沙利铂组和ProTα+奥沙利铂组瘤组织中自噬相关LC3B蛋白的表达显著上调,P62及p-mTOR蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ProTα 可以诱导H22荷瘤小鼠肝癌细胞的自噬,主要通过调节免疫细胞释放干扰素IFN-γ等细胞因子并下调p-mTOR表达诱导自噬发挥抗肿瘤作用;并且ProTα可以提高奥沙利铂的抗癌疗效.

关键词：肝癌、ProTα、细胞自噬、凋亡、微管相关蛋白轻链3、p-mTOR、小鼠

所属期刊栏目：12

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：福建省医学创新课题2018-CXB-24

在线出版日期：2022-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：25-29