10.3969/j.issn.1006-4931.2021.17.009
杞归八味口服液对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的防护作用
目的 探讨杞归八味口服液对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的防护作用及作用机制.方法 通过4μmol/L鱼藤酮作用PC12细胞24 h构建细胞损伤模型,将建模成功的细胞分为杞归1组、2组、3组、4组、5组(相当于杞归八味口服液原液的0.1%,0.2%,0.4%,0.6%,0.8%),鱼藤酮1组、2组、3组、4组、5组(相当于鱼藤酮0.5,1.0,2.0,4.0,8.0μmol/L),另取正常细胞作为空白对照组(水),各组细胞均予相应药物.采用CCK-8检测细胞活性,并计算细胞存活率;采用AnnexinV-FITC/PI双染及流式细胞术检测细胞凋亡率;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测聚腺苷二磷酸-核糖多聚酶(PARP)、cleaved-Caspase3(c-Caspase3)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、c-Jun氨基端蛋白激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)细胞的蛋白表达水平.结果 与空白对照组比较,杞归3组、4组、5组的细胞存活率均显著升高,鱼藤酮1组、2组、3组、4组、5组的细胞存活率均显著降低,且均呈量效依赖趋势(P<0.05);与鱼藤酮4组比较,杞归3,4,5+鱼藤酮4组的细胞存活率均显著升高,且呈量效依赖趋势(P<0.01);与空白对照组比较,鱼藤酮4组的细胞凋亡率、c-Caspase3和p-JNK蛋白表达水平均显著升高,PARP,p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与鱼藤酮4组比较,杞归4+鱼藤酮4组的细胞凋亡率、c-Caspase3和p-JNK蛋白表达水平均显著降低,PARP,p-AKT,p-mTOR蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).结论 杞归八味口服液能减轻鱼藤酮对PC12细胞的损伤作用,可能与减弱了鱼藤酮对AKT/mTOR及JNK信号通路的影响有关.
杞归八味口服液;鱼藤酮;PC12细胞;凋亡;神经保护;蛋白激酶B;哺乳动物雷帕素靶蛋白;c-Jun氨基端蛋白激酶;作用机制
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R932;R285.5(生药学(天然药物学))
重庆市卫生计生委中医科技项目[ZY201801004
2021-09-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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