三阴性乳腺癌耐药细胞模型的构建及其生物学特性考察
目的 建立人三阴性乳腺癌细胞耐药模型MDA-MB-231/DOX,并考察其生物学特性.方法 以人三阴性乳腺癌细胞为亲本细胞,采用低浓度持续加量诱导法建立耐受盐酸多柔比星的细胞株MDA-MB-231/DOX.在显微镜下观察细胞形态学的变化;利用细胞毒性实验检测化疗药物对细胞的半数抑制浓度(IC50)和细胞的耐药指数(RI),并绘制细胞生长曲线;通过流式细胞术检测细胞周期变化;采用Western blot法检测细胞中P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP2)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、葡萄糖转运蛋白(GLUT1、GLUT3)的表达;通过检测细胞中丙酮酸、乳酸、三磷酸腺苷(ATP)浓度考察MDA-MB-231/DOX细胞在能量代谢方面的生物学特性.结果 所构建的能够耐受不同浓度盐酸多柔比星的MDA-MB-231/DOX细胞,其耐药指数在61~189范围内,对紫杉醇、顺铂和10-羟基喜树碱的耐药指数分别为1 585.12、29.67、2.01;耐药细胞MDA-MB-231/DOX中P-gp、MRP2的蛋白表达水平明显高于亲本细胞MDA-MB-231,丙酮酸浓度、乳酸浓度、ATP浓度、GLUT1表达均高于亲本细胞MDA-MB-231.结论 成功构建了人三阴性乳腺癌耐药细胞株MDA-MB-231/DOX,具有多药耐药性,其生物学特性与亲本细胞存在一定差异,为乳腺癌体外模型及其耐药机制的研究提供实验基础.
三阴性乳腺癌、盐酸多柔比星、能量代谢、耐药、MDA-MB-231/DOX细胞株
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R965.1(药理学)
国家自然科学基金;上海市科委优秀学术带头人项目;上海中医药大学产业发展中心医养结合科创项目
2023-02-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共10页
1901-1910