依托咪酯通过调控miR-211-5p/ROBO1的表达抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究
目的 探究依托咪酯通过调控miR-211-5 p/ROBO1的表达抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制.方法 qRTPCR、Western blot检测依托咪酯对胃癌AGS和MNK-45细胞中miR-211-5p和ROBO1表达的影响,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测对细胞增殖的影响,Transwell实验检测对细胞侵袭、迁移能力的影响,双荧光素酶报告实验和Western blot检测miR-211-5p与ROBO1的联系,过表达miR-211-5p或者抑制ROBO1的表达,观察对胃癌AGS和MNK-45细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.结果 与对照组比较,依托咪酯0.2、0.4和0.8 μg·mL-1组胃癌AGS和MNK-45细胞的增殖抑制率、miR-211-5p、p21水平呈剂量依赖性升高,迁移和侵袭细胞数目、ROBO1、cyclin D1、MMP-2、MMP-9水平呈剂量依赖性降低(P＜0.05);TargetScan生物信息学软件预测显示,miR-211-5p与ROBO1 3'UTR存在互补序列;双荧光素酶报告实验显示,miR-211-5p与ROBO1存在特异性结合位点;Western blot验证显示,miR-211-5p负向调控ROBO1的表达;与miR-NC比较,过表达miR-211-5p后,miR-211-5p组胃癌AGS和MNK-45细胞的增殖抑制率、p21水平显著升高,迁移和侵袭细胞数目、cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P＜0.05);与si-NC比较,抑制ROBO1表达后,si-ROBO1组胃癌AGS和MNK-45细胞的增殖抑制率、p21水平显著升高,迁移和侵袭细胞数目、ROBO1、cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著降低(P＜0.05);与依托咪酯+anti-miR-NC组比较,依托咪酯+anti-miR-211-5p组胃癌AGS和MNK-45细胞中miR-211-5 p、p21、细胞增殖抑制率显著降低,迁移和侵袭细胞数目、ROBO1、cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白水平显著升高(P＜0.05).结论 依托咪酯可抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其可能通过调控miR-211-5 p/ROBO1的表达发挥抑制胃癌细胞增殖、迁移侵袭的作用.
依托咪酯、miR-211-5p、ROBO1、胃癌细胞、增殖、迁移、侵袭
55
R965(药理学)
2020-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
1686-1695
