慢病毒介导的FLOT1基因表达对胃癌细胞侵袭凋亡的机制研究
目的 探讨抑制FLOT1基因表达对胃癌细胞侵袭、凋亡的影响及机制.方法 将设计合成的FLOT1siRNA慢病毒载体(si-FLOT1组)转染人胃癌MKN-45细胞,同时转染阴性对照慢病毒载体(阴性组),并设置空白组.Western blotting检测转染48 h后细胞FLOT1、E-cadherin、α-SMA、cleaved caspase 3、Bcl-2和Bax蛋白表达.CCK-8法检测转染24、48、72和96 h的细胞活力.Transwell小室、流式细胞术及DCFH-DA法分别检测转染48 h的细胞侵袭能力、凋亡率及活性氧(ROS)含量.结果 FLOT1 siRNA慢病毒载体可明显抑制MKN45细胞FLOT1表达,与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05).si-FLOT1组与空白组比较,细胞活力降低,细胞侵袭能力降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin、cleaved caspase 3和Bax蛋白表达升高,α-SMA和Bcl-2蛋白表达降低,ROS含量升高,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 下调FLOT1基因表达可通过抑制EMT降低胃癌细胞侵袭能力,通过调控凋亡相关蛋白表达及提高细胞ROS含量促进细胞凋亡.
胃癌、FLOT1基因、侵袭、凋亡、上皮细胞间质转化
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R965(药理学)
2019-10-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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