转录信号转导子与激活子3小分子干扰RNA增强乳腺癌对多柔比星的药物敏感性
目的 进一步明确转录信号转导子与激活子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)信号通路在调节乳腺癌多柔比星耐药中的作用,促进转录信号转导子与激活子3信号通路抑制剂在逆转肿瘤耐药方面的临床应用.方法 首先在临床乳腺癌组织标本水平,应用Western blotting检测转录信号转导子与激活子3与活化磷酸化转录信号转导子与激活子3(phosphorylated STAT3,pSTAT3)的表达水平,同时应用RT-PCR及Western blotting检测转录信号转导子与激活子3/磷酸化转录信号转导子与激活子3在乳腺癌敏感及耐药细胞中的表达水平;再应用小分子干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)技术阻断转录信号转导子与激活子3表达,通过Western blotting方法检测转录信号转导子与激活子3-小分子干扰RNA对转录信号转导子与激活子3表达的影响;最后分别应用细胞免疫荧光法和四甲基偶氮唑蓝法,检测阻断转录信号转导子与激活子3表达后,乳腺癌细胞的增殖活性及IC50值,从而观察转录信号转导子与激活子3-小分子干扰RNA是否能够抑制乳腺癌细胞增殖,以及能否增强乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性.结果 转录信号转导子与激活子3/磷酸化转录信号转导子与激活子3在肿瘤组织以及在多柔比星敏感及耐药的乳腺癌细胞中均呈现高水平表达,并且在多柔比星耐药乳腺癌细胞中的表达高于在相应敏感细胞中的表达水平.转录信号转导子与激活子3-小分子干扰RNA明显下调转录信号转导子与激活子3蛋白表达,并抑制了敏感乳腺癌细胞的生长.转录信号转导子与激活子3-小分子干扰RNA和多柔比星联合应用后,与单独应用多柔比星比较,使多柔比星耐药乳腺癌细胞的IC50降低了4倍,同时抑制了转录信号转导子与激活子3信号通路介导的抗凋亡蛋白的表达.结论 转录信号转导子与激活子3信号通路活化与乳腺癌发生相关,在多柔比星耐药乳腺癌细胞中显著活化,阻断乳腺癌多柔比星耐药细胞中转录信号转导子与激活子3信号通路可提高其对多柔比星的敏感性,并促进细胞凋亡.本试验为探索阻断转录信号转导子与激活子3信号通路逆转肿瘤耐药的可行性,以及临床联合应用转录信号转导子与激活子3抑制剂与化疗药物克服肿瘤细胞多药耐药现象提供实验基础.
转录信号转导子与激活子3、乳腺癌、耐药、多柔比星、小分子干扰RNA
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R965(药理学)
河南省卫生厅医学科技攻关计划资助项目201303013
2016-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
896-903
