黄芪甲苷对H2O2所致大鼠心肌细胞线粒体损伤的保护作用及其机制研究
目的 研究黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ)对大鼠心肌细胞线粒体保护作用及其信号转导机制.方法 酶消化法分离大鼠心肌细胞;实验随机分为对照组、黄芪甲苷组、黄芪甲苷+抑制荆组[cGMP抑制剂ODQ、PKG抑制剂KT5823、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NAME、线粒体ATP敏感性钾离子通道(mKATP)抑制剂5-HD]、抑制剂组;共聚焦显微镜观察线粒体膜电位(△Ψm),100 μmol·L-1H2O2造成心肌细胞氧化损伤,进而确定线粒体通透性转移孔(mPTP)的开放程度;DAF-FM荧光探针观察一氧化氮(NO)产生情况;Western blot检测磷酸化糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和血管扩张剂刺激磷蛋白(VASP)蛋白表达.结果 50μmol·L-1黄芪甲苷能够模拟环孢素抑制线粒体通透性转移孔开放的作用,此作用被ODQ及KT5823所逆转;黄芪甲苷使磷酸化GSK-3β蛋白表达明显增多,此作用被ODQ、KT5823及L-NAME所阻断,5-HD未改变此作用;黄芪甲苷明显增加磷酸化血管扩张剂刺激磷蛋白表达,此作用被ODQ、KT5823所抑制;黄芪甲苷增加一氧化氮的释放,此作用被L-NAME所逆转.结论 黄芪甲苷通过一氧化氮合酶产生一氧化氮,激活cGMP/PKG,使GSK-3β失活进而抑制mPTP的开放,发挥H2O2所致大鼠心肌细胞线粒体损伤的保护作用,线粒体ATP敏感性钾离子通道可能未参与此过程.
黄芪甲苷、心肌细胞、线粒体、一氧化氮、线粒体通透性转移孔
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R965(药理学)
河北省自然科学基金;河北省中医药局科研项目;河北联合大学杰出青年基金
2014-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1519-1523
