龙葵碱通过线粒体途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡
目的 研究龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响并探讨相关机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同浓度龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用;4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色荧光显微镜进行细胞凋亡核形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光显微镜结合Fluo-8/Am法、流式细胞术和分光光度比色法分别检测胞内Ca2+浓度、线粒体膜电位(△Ψm)和caspase-3,caspase-8活性变化.结果 四甲基偶氮唑蓝法结果显示,龙葵碱对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制作用.10.0 mmol.L-1龙葵碱处理2d,4,6-二眯基-2-苯基吲哚染色可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带.10.0 mmol.L-1龙葵碱处理1,2,3d的细胞凋亡率分别为(20.9±7.3)%、(42.6±8.8)%和(74.9±12.8)%;细胞内Ca2+荧光强度分别为35.6±2.9、52.3±5.6和27.2±2.2;线粒体膜电位(△Ψm)值分剐下降7.7%、33.2%和46.9%;caspase-8活性在ld达最高(1.85±0.09)U·μg-1,caspase-3活性则在2d达最高(2.18±0.09)U·μg-1,与对照组相比均有统计学显著性差异(P<0.05).结论 龙葵碱可诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与胞内Ca2+浓度升高、线粒体膜电位降低和caspase-3、8活化有关.
龙葵碱、MCF-7细胞、细胞凋亡、钙离子、线粒体膜电位、半胱氨酸天冬氨酸酶家族
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R965(药理学)
嘉兴学院实验技术专项70113004BW
2014-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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