基于人PPARα为靶标的药物筛选细胞模型的建立与应用评价

摘要：

目的 构建一种新的、具有生物活性检测能力的人过氧化物酶体增殖物激活受体α(hPPARo)配体药物筛选细胞模型.方法 采用Lipofectamine 2000将含人PPARα基因质粒phPPARα-IRES2-EGFP、含人PPRE报告质粒ptk-PPRE×3-1uc及内部对照质粒pRL-CMV共转染293T细胞,并对phPPARα-IRES2-EGFP转染效率进行流式细胞仪(FCM)分析；通过双荧光素酶报告基因法(DLR)检测不同浓度、不同时间阳性药物WY14643干预共转染细胞体系的荧光素酶表达活性；实验还换用RXRα激动剂全反式维甲酸(ATRA)干预,以评价该细胞模型反应的特异性；并用贝特类降脂药苯扎贝特、环丙贝特、氯贝丁酯对建立的药物筛选细胞模型进行应用能力评价.结果 FCM检测共转染293T细胞phPPARα-IRES2-EGFP质粒转染效率为68％；DLR检测WY14643干预该hPPARα药物筛选模型获得了理想的量—效、时—效关系结果,且该模型不能通过RXRα配体激动剂ATRA激活.苯扎贝特、环丙贝特、氯贝丁酯干预模型均呈现良好的量—效反应性,且反应强度存在差异(P＜0.05).结论 成功构建了基于hPPARα为靶标的药物筛选细胞模型,为筛选具有生物活性的hPPARα配体激动剂新药提供了一种可靠的新平台.

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体α、药物筛选、293T细胞、报告基因

所属期刊栏目：46

分类号：R965.1(药理学)

资助基金：贵州省科技计划2008-2152

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1798-1804