三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用

摘要：

目的 探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4+T细胞增殖以及IFN-γ和IL-4转录和翻译水平的影响.方法 免疫磁珠分别分选15只MRL/lpr狼疮小鼠和15只C57BL正常对照小鼠脾脏CD4+T细胞,进而将CD4+T细胞随机分为空白组(RPMI1640),对照组(PHA20mg·L-1+IL-21 000u·mL-1),ATO组”PHA 20mg·L-1+IL-2 1 000 u·mL-1(48 h)后+ATO 1.0 μmol·L-1”,体外共培养至72 h.采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组CD4+T细胞的增殖和抑制水平;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IFN-γ和IL-4水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述细胞因子基因的转录水平.结果 ①分选后获得的CD4+T细胞纯度为(94.12±1.08)%,细胞存活率为(95.82±3.41)%;②MRL/lpr小鼠对照组CD4+T细胞的增殖水平(A值)(0.343±0.019)较空白组(0.054±0.008)高(P<0.001);却低于C57BL小鼠对照组的水平(0.375±0.018)(P<0.05);③MRL/lpr和C57BL小鼠ATO组CD4+T细胞增殖水平(A值)分别为(0.324±0.013)和(0.362±0.013),均低于对照组(P<0.05,P<0.05);④MRL/lpr小鼠对照组IFN-γ的表达水平”(562.287±60.345)ng·L-1”明显高于C57BL小鼠对照组”(253.208±59.434)ng·L-1”(P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γ的抑制程度大于C57BL小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠对照组的IL-4表达水平”(41.332±8.039)ng·L-1”与ATO组”(23.046±3.253)ng·L-1”和C57BL小鼠对照组”(29.303±8.038)ng·L-1”比较,也具有明显的统计学差异(P<0.05和P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IL-4的抑制程度高于C57BL小鼠(P<0.05);⑤在转录水平上,与C57BL小鼠相比,ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γmRNA和IL-4mRNA的抑制程度更加明显(P<0.05和P<0.05);ATO对IFN-γ和IL-4表达水平的抑制和转录水平的抑制正相关,r=0.720(P<0.001)和r=0.557(P<0.01).结论 MRL/lpr小鼠存在CD4+T细胞的异常增殖,ATO能在不影响细胞存活率的浓度下抑制MRL/lpr小鼠CD4+T细胞的异常增殖活化,通过抑制其细胞因子IFN-γ和IL-4的mRNA分泌影响两者的表达,且对MRL/lpr小鼠抑制程度大于C57BL小鼠,表明ATO能抑制狼疮鼠的异常免疫功能,可进一步用于SLE的治疗.

关键词：系统性红斑狼疮、三氧化二砷、CD4+T细胞、γ-干扰素、白介素-4

所属期刊栏目：44

分类号：R593.241(全身性疾病)

资助基金：浙江省自然科学基金M303606;温州市科技局资助项目Y2003A007

在线出版日期：2009-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：836-841