v-Src蛋白在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其活性分析

摘要：

目的表达高纯度具有激酶活性的Src蛋白,为抗肿瘤药物研究提供蛋白质靶标.方法利用高效表达质粒pGEX-KT克隆v-Src全基因,诱导表达得到的GST-Src融合蛋白经Glutatione Sepharose 4B亲和层析柱纯化后,采用Western blotting和以polyGlu:Try(4:1)为底物的ELISA法鉴定其免疫原性和酪氨酸激酶活性.结果CST-Src蛋白表达量约占菌体总蛋白的30%,其中包涵体与可溶性蛋白的表达量分别约13.5和2 mg·L-1,纯度分别约98%和85%,比活约1.13和0.62nmol·min-1·mg-1.结论本法表达的GST-Src融合蛋白表达量高、纯化效果好,且具有较高的激酶比活.

关键词：病毒癌基因表达蛋白、酪氨酸蛋白激酶、融合表达、包涵体

所属期刊栏目：40

分类号：R936(生药学（天然药物学）)

资助基金：国家科技创新基金03C26213300586

在线出版日期：2005-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：943-946