重组人胰岛素样生长因子-1分离纯化工艺的建立

摘要：

目的建立重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺,以便获得高纯度的重组蛋白.方法已构建好的表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导进行表达.将离心收集到的菌体用超声破壁,破壁菌液离心分离,收集上清液,进行阴离子交换层析、疏水层析和分子筛纯化,得到最终纯品.蛋白纯度用SDS-PAGE鉴定,ELISA法检测rhIGF-1含量,检测纯化后重组蛋白的生物学活性.结果用大肠杆菌BL21表达rhIGF-1以可溶性形式存在胞浆中,经3步柱层析纯化后,可获得高纯度的rhIGF-1(纯度>98%).该蛋白在体外具有良好的促NIH3T3细胞增殖作用.结论建立了rhIGF-1分离纯化工艺,其工艺流程可获得具有生物学活性的高纯度rhIGF-1,为产业化及临床应用奠定基础.

关键词：胰岛素样生长因子-1、表达、纯化

所属期刊栏目：37

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家新药研究和产业化开发工程1035计划96-901-01-57

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：376-379