二甲双胍调控Gas6/Axl信号通路抑制食管鳞癌细胞增殖及迁移

摘要：

目的 探讨二甲双胍对食管鳞癌细胞增殖及迁移的抑制作用,以及生长停滞特异性蛋白6(growth-arrest-specific protein 6,Gas6)与其配体Axl的调控机制.方法 食管鳞癌EC109和TE-1细胞用不同浓度二甲双胍处理后,采用CCK-8法或克隆形成实验测定细胞增殖情况,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力,TUNEL实验标记细胞凋亡比例,Mito-SOX探查线粒体氧化应激状态,JC-1显示线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平,免疫荧光实验检测Gas6表达,Western blot法分析Gas6/Axl通路和凋亡相关蛋白变化.此外,联合Axl高效抑制剂(bemcentinib,R428)处理后,观察二甲双胍对EC109细胞增殖、迁移及裸鼠皮下成瘤能力的影响.结果 相较于对照组,二甲双胍显著降低EC109和TE-1细胞的活性(PEC109<0.001;PTE-1<0.001),而对Het-1A细胞活性的影响并不显著(P=0.38);同时二甲双胍抑制EC109细胞克隆形成能力(P=0.002)和迁移能力(P<0.001),增加凋亡率(P=0.002),上调线粒体活性氧水平(P<0.001),下调MMP水平(P<0.001).此外,二甲双胍可降低EC109细胞Gas6荧光强度,阻断EC109和TE-1细胞中Gas6表达,下调EC109细胞内p-Axl、Axl和Bcl2的水平,并增加Bax以及细胞色素C和Caspase3活性.二甲双胍联合R428较单独二甲双胍能更有效抑制EC109细胞增殖、迁移及裸鼠皮下成瘤能力.结论 二甲双胍能够调节线粒体稳态,激活氧化应激诱导的凋亡反应,进而发挥抗EC109细胞增殖及迁移作用,该作用可能与下调Gas6/Axl信号通路相关.

关键词：食管鳞状细胞癌、二甲双胍、Gas6/Axl信号通路、线粒体稳态、凋亡

所属期刊栏目：15

分类号：R735.1(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;空军特色医学中心博士助推项目

在线出版日期：2023-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：516-524