10.3969/j.issn.1674-5671.2023.03.06
白鲜碱靶向调控PI3K/KEAP1信号抑制卵巢癌细胞增殖并诱导自噬及凋亡
目的 探讨白鲜皮活性单体白鲜碱(Dictamnine)对卵巢癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其作用机制.方法 人卵巢癌细胞系(A2780、PA-1)及人正常卵巢上皮细胞株(IOSE80)分别用不同浓度白鲜碱(0、32、65、125、250 μmol/L)处理,CCK-8实验检测各细胞IC50值.利用网络药理学筛选出白鲜碱治疗卵巢癌的核心靶点,分子对接评估结合能力.选取A2780细胞用白鲜碱(0、50、75 μmol/L)处理后,利用CCK-8实验、HE染色、Annexin V-FITC/PI双染法、Western blot法分析白鲜碱对A2780细胞增殖、凋亡和自噬的影响.裸鼠皮下移植瘤模型观察白鲜碱对卵巢癌移植瘤生长的影响,HE染色和透射电子显微镜观察移植瘤组织形态及超微结构,免疫组化染色(IHC)检测移植瘤组织中Cleaved PARP、Ki67的表达水平.结果 CCK-8实验结果显示,白鲜碱作用于A2780细胞、PA-1细胞的IC50显著低于IOSE80细胞,其中对A2780细胞的抑制作用最强;白鲜碱(50 μmol/L、75 μmol/L)处理组的A2780细胞增殖能力较未处理细胞明显下降(均P<0.05).网络药理学筛选出10个白鲜碱抗卵巢癌的核心靶点,结合能力较强的靶点为 PIK3CD、KEAP1、AHR.流式细胞术结果显示白鲜碱处理48 h、72 h后A2780细胞凋亡率均明显上升(均P<0.01).Western blot实验显示,与未处理组相比,白鲜碱处理组的A2780细胞中凋亡相关蛋白Cleaved PARP、PARP表达水平明显升高;自噬相关蛋白SQSTM1/p62、KEAP1表达水平下降,LC3BⅡ/Ⅰ比例升高;PI3K信号通路蛋白PI3K表达水平下降(均P<0.05).白鲜碱处理后,裸鼠移植瘤体积明显减小(P=0.0053);镜下可见瘤组织有明显凋亡细胞;IHC染色结果显示Ki67表达水平降低,Cleaved PARP表达水平上升(均P<0.001).HE染色结果显示白鲜碱处理后A2780细胞呈短纺锤形或卵圆形,且体积变小;移植瘤组织中存在凋亡/坏死细胞.结论 白鲜碱可能靶向调控PI3K/KEAP1信号转导抑制卵巢癌细胞增殖并诱导自噬及凋亡.
卵巢癌、白鲜碱、增殖、凋亡、自噬、网络药理学
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R737.3(肿瘤学)
国家自然科学基金;广西创新驱动发展专项;教育部重点实验室自主研究基金;教育部重点实验室自主研究基金;教育部重点实验室自主研究基金
2023-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
285-291
