10.3969/j.issn.1674-5671.2023.01.05
SIRT4通过调控MAPK信号通路和脂代谢途径抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭及裸鼠移植瘤生长
目的 探讨SIRT4调控MAPK信号通路和脂代谢途径对胰腺癌细胞增殖和侵袭及裸鼠移植瘤生长的影响.方法 收集2021年6月1日—2022年7月28日于广西医科大学第一附属医院肝胆外科经手术治疗的5例胰腺导管腺癌患者的癌组织和癌旁组织样本,选取人正常胰腺细胞株(HPDE6?C7)及胰腺癌细胞系(CFPAC?1、PANC?1、BXPC?3、ASPC?1),采用RT?qPCR和Western blot检测SIRT4在胰腺癌组织和细胞中的表达水平.通过质粒转染法构建过表达SIRT4的BXPC?3和PANC?1细胞株,采用CCK?8实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力.使用慢病毒载体构建稳定过表达SIRT4的BXPC?3细胞株并接种至裸鼠腋下,采用裸鼠成瘤实验观察SIRT4对体内肿瘤生长的影响;免疫组织化学实验检测裸鼠移植瘤中Ki67的表达水平.通过mRNA?seq检测分析SIRT4下游分子的表达情况,用Western blot检测MAPK信号通路及脂代谢相关蛋白的表达水平.结果 RT?qPCR和Western blot检测结果显示,相对于癌旁组织,胰腺癌组织中SIRT4 mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05).CCK?8实验、平板克隆形成实验和Transwall侵袭实验结果显示,相对于NC组,SIRT4?OE组的BXPC?3和PANC?1细胞增殖和侵袭能力均降低(均P<0.05);裸鼠成瘤实验发现SIRT4过表达后移植瘤体积和重量明显减少(均P<0.05);免疫组织化学实验结果显示,与NC组相比,SIRT4?OE组移植瘤中的Ki67阳性细胞个数明显减少(P=0.002);mRNA?seq及富集分析结果显示,SIRT4下游差异表达基因显著富集于MAPK信号通路.进一步Western blot检测结果显示,过表达SIRT4后,MAPK信号通路相关蛋白p?ERK蛋白表达水平降低,而JNK、p?JNK、p38和p?p38的蛋白表达水平变化不明显;脂质生成关键因子ACC、FASN和SREBP1C的蛋白表达水平降低,而脂代谢调节因子PPARα和CPT1a的蛋白表达水平升高.结论 SIRT4可能通过抑制MAPK信号通路和脂质代谢途径抑制胰腺癌增殖和侵袭及裸鼠移植瘤生长.
胰腺癌、SIRT4、脂质代谢、MAPK信号通路、增殖、侵袭
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R735.9(肿瘤学)
广西自然科学基金项目;广西重点研发计划项目
2023-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
30-37
