10.3969/j.issn.1674-5671.2022.06.04
miR?449a通过NOTCH1介导铁死亡调控非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡
目的 探讨miR-449a对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的调控作用及其分子机制.方法 用miR-499a过表达类似物Agomir-499a(Agomir-499a组)及其阴性对照(NC组)分别转染非小细胞肺癌NCI-H1975细胞,采用qRT-PCR检测转染细胞中miR-499a的表达水平,CCK-8和Ki67染色法检测细胞增殖,Annexin V染色法检测细胞凋亡.采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)和谷胱甘肽(GSH)分别处理转染Agomir-499a的NCI-H1975细胞(依次记为Agomir-499a+Fer-1组和Agomir-499a+GSH组),采用荧光探针法检测细胞内的Fe2+水平,光学比色法检测细胞内的GSH含量,qRT-PCR检测细胞内铁死亡和铁稳态相关基因的mRNA表达,Western blot检测NOTCH1信号通路相关蛋白的表达.结果 与NC组比较,Agomir-499a组NCI-H1975细胞的miR-449a表达水平明显增加(P=0.001),细胞增殖活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡比例明显增加(P=0.004);铁死亡相关因子PTGS2、ACSL4、SLC7A11和COX2的表达水平,Fe2+细胞比例以及铁稳态相关基因TF、STEAP3、TFRC和DMT1的表达水平均明显增加(均P<0.05),但GSH含量以及NOTCH1信号通路相关分子NOTCH1、NICD、JAG1、JAG2、DLL1和HES1的表达水平均明显降低(均P<0.05).与Agomir-449a组比较,Agomir-449a+Fer-1组铁死亡相关因子PTGS2、ACSL4、COX2和SLC7A11的表达水平,Fe2+细胞比例以及铁稳态相关基因TF和STEAP3的表达水平均明显降低(均P<0.05),但GSH含量和NOTCH1信号通路相关分子NICD、JAG1和DLL1的表达水平均明显增加(均P<0.05);Agomir-449a+GSH组SLC7A11、COX2和ACSL4的表达水平也较Agomir-449a组明显降低(均P<0.05).结论 miR-449a可诱导非小细胞肺癌NCI-H1975细胞凋亡和增殖抑制,其作用机制可能与抑制NOTCH1信号介导的铁死亡有关.
非小细胞肺癌、miR-449a、NOTCH1信号通路、铁死亡、增殖、凋亡
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R734.2(肿瘤学)
内蒙古医科大学联合项目YKD2021LH033
2023-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
617-623
