miR?203a?3p通过靶向LASP1介导Akt/GSK?3β/Snail信号通路调控肝癌细胞生物学行为

摘要：

目的 研究miR?203a?3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞生物学行为的影响及其相关分子机制.方法 将miR?203a?3p模拟物(miR?203a?3p mimics)及阴性对照(miR?NC mimics)、LIM和SH3蛋白1(LIM and SH3 protein 1,LASP1)过表达质粒(pcDNA?LASP1)及阴性对照质粒(pcDNA?NC)分别转染至HepG2细胞.以qRT?PCR法检测细胞miR?203a?3p、LASP1 mRNA表达情况,CCK?8法和异体移植瘤实验分析细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,Annexin V?FITC/PI法检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因检测miR?203a?3p与LASP1的靶向关系,Western blot法检测细胞中LASP1、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p?Akt)、糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase?3β,GSK?3β)、磷酸化GSK?3β(phosphorylated GSK?3β,p?GSK?3β)、Snail表达情况.结果 与miR?NC组相比,miR?203a?3p组HepG2细胞增殖活性、迁移率、侵袭数目、LASP1 mRNA和蛋白表达量、p?Akt/Akt和p?GSK?3β/GSK?3β比值、Snail蛋白表达量均显著降低,小鼠移植瘤体积和质量显著减少,细胞凋亡率显著升高(均P<0.01).Targetscan软件预测显示,miR?203a?3p与LASP1存在靶向关系;与LASP1?Wt+miR?NC组比较,LASP1?Wt+miR?203a?3p组相对荧光素酶活性显著下降(P<0.001).与miR?203a?3p+pcDNA?NC组比较,miR?203a?3p+LASP1组HepG2细胞增殖活性、迁移率、侵袭数目、p?Akt/Akt和p?GSK?3β/GSK?3β比值、Snail蛋白表达量均显著升高,小鼠移植瘤体积和质量显著增加,细胞凋亡率显著降低(均P<0.01).结论 miR?203a?3p可能通过靶向抑制LASP1表达调控Akt/GSK?3β/Snail信号通路活性,从而调控HCC细胞生物学行为.

关键词：肝细胞癌、miR-203a-3p、LASP1、增殖、迁移、侵袭、凋亡、Akt/GSK-3β/Snail信号通路

所属期刊栏目：14

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：沧州市重点研发计划自筹经费项目204106065

在线出版日期：2022-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：508-514