10.3969/j.issn.1674‑5671.2022.02.03
LncRNA DLX6⁃AS1通过miR⁃181b/IL⁃6轴影响食管癌细胞的恶性生物学行为
目的 探讨长链非编码RNA(long non?coding RNA,lncRNA)同源盒转录因子6反义RNA1(homeobox transcription factor 6 antisense RNA1,DLX6?AS1)调控miR?181b/白细胞介素?6(interleukin?6,IL?6)轴对食管癌Eca?109细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 选取人食管上皮细胞株HEEC和人食管鳞状细胞癌细胞株Eca?109,采用qRT?PCR检测lncRNA DLX6?AS1、miR?181b及IL?6的表达水平.将si?DLX6?AS1、miR?181b mimics、pcDNA?IL?6、pcDNA?IL?6+miR?181b mimics及其相应阴性对照分别转染至Eca?109细胞,采用qRT?PCR检测转染效果,CCK?8法和EdU染色实验检测细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的迁移与侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA DLX6?AS1与miR?181b、miR?181b与IL?6的靶向关系.结果 与HEEC细胞相比,Eca?109细胞中lncRNA DLX6?AS1、IL?6 mRNA的表达水平升高(P=0.005,0.006),但miR?181b表达水平降低(P=0.004).与相应阴性对照组比较,si?DLX6?AS1组和miR?181b mimics组的细胞增殖活性和EdU阳性细胞率均降低(均P<0.05),细胞迁移数目与侵袭数目均减少(均P<0.05),而pcDNA?IL?6组的细胞增殖活性和EdU阳性细胞率升高(均P<0.05),细胞迁移数目与侵袭数目增加(均P<0.05).lncRNA DLX6?AS1与miR?181b存在靶向结合关系,miR?181b mimics和野生型DLX6?AS1载体共转染后,细胞内的荧光素酶活性明显降低(P=0.006);下调DLX6?AS1表达后Eca?109细胞中miR?181b表达水平升高(P=0.010).miR?181b与IL?6存在靶向结合关系,miR?181b mimics和野生型IL?6载体共转染后,细胞内的荧光素酶活性明显降低(P<0.05);过表达miR?181b后Eca?109细胞中IL?6的表达水平降低(P<0.05).与pcDNA?IL?6组比较,pcDNA?IL?6与miR?181b mimics共转染后,Eca?109细胞中IL?6 mRNA和蛋白表达水平下降,细胞增殖活性和EdU阳性细胞率降低,细胞迁移数目与侵袭数目也减少(均P<0.05).结论 LncRNA DLX6?AS1通过miR?181b靶向负调控IL?6表达而促进食管癌Eca?109细胞增殖、迁移及侵袭.
食管癌、长链非编码RNA、同源盒转录因子6反义RNA1、miR-181b、白细胞介素-6
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R735.1(肿瘤学)
新疆维吾尔自治区自然科学基金2021D01C286
2022-05-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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