10.3969/j.issn.1674-5671.2020.06.11
GATA4基因甲基化及GATA4对非小细胞肺癌生长的影响及其作用机制
目的 探讨GATA4在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的甲基化状态和GATA4对NSCLC细胞生长的作用及其可能机制.方法 收集2017年7月—2018年6月于新疆医科大学第一附属医院接受肺癌根治术的78例NSCLC患者癌组织及其癌旁组织标本,以及人肺癌细胞株A549、HCC827、NCI-H1299和人正常肺上皮细胞BEAS-2B,用MSP和qMSP检测GATA4基因甲基化状态,RT-PCR和Western blot检测GATA4表达.将sh-GATA4-1(sh-GATA4组)、sh-NC、GATA4过表达载体(pLV-GATA4组)及其空载体对照慢病毒液(pLV-NC组)分别转染至肺癌A549细胞中,同时设置空白对照组(Blank组),用Western blot检测GATA4、p-ERK、ERK、p-p38和p38蛋白表达,CCK-8试剂盒检测细胞活力,细胞克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 NSCLC组织中GA TA 4基因甲基化率以及p-ERK、p-p38和Bcl-2蛋白表达水平均高于癌旁组织(P<0.001),GATA4 mRNA表达、GATA4和Bax蛋白表达均低于癌旁组织(P<0.001).GATA4基因甲基化程度与p-ERK、p-p38和Bcl-2蛋白表达水平呈正相关(P<0.05);与GATA4 mRNA表达水平,GATA4、Bax蛋白表达水平呈负相关(P<0.05).NSCLC细胞中GATA4呈甲基化状态,人正常肺上皮细胞BEAS-2B表现为去甲基化状态,GATA4 mRNA和蛋白表达低于BEAS-2B细胞(P<0.01).与pLV-NC组比较,pLV-GATA4组细胞中GATA4 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率升高(P<0.001),细胞活力、细胞克隆数、p-ERK/ERK和p-p38/p38蛋白表达水平降低(P<0.05);sh-GATA4组细胞中GATA4 mRNA、蛋白表达和细胞凋亡率低于sh-NC组(P<0.001),细胞活力、细胞克隆数、p-ERK/ERK和p-p38/p38蛋白表达高于sh-NC组(P<0.05).结论 GATA4基因在非小细胞肺癌中呈高甲基化状态并诱导GATA4基因表达降低,GATA4过表达可抑制肺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,可能通过调控MAPK通路实现.
非小细胞肺癌、GATA4、甲基化、MAPK通路
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R734.2(肿瘤学)
自治区区域协同创新专项科技援疆计划2020E0272
2021-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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