重组质粒 BFP-cyclin D1的构建及表达对乳腺癌 MCF-7细胞增殖和迁移能力的影响

摘要：

目的 构建含人 cyclin D1 基因全长编码区的蓝色真核荧光表达载体 BFP-cyclin D1,并观察 cyclin D1 的表达对MCF-7 增殖和迁移能力的影响.方法 以人乳腺癌 MCF-7 细胞总 RNA为模板,经 PCR扩增和酶切后与 pEBFP-N1 质粒连接,得到重组质粒BFP-cyclin D1.转染到人乳腺癌 MCF-7细胞后分为 3 组:实验组转染 BFP-cyclin D1,阴性对照组转染 pEBFP-N1;空白对照组为 MCF-7,以荧光定量 PCR 检测基因表达;MTT 实验检测细胞生长速度;细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果 成功构建了 BFP-cyclin D1,并在人乳腺癌 MCF-7 细胞中呈高表达,荧光定量 PCR 检测示实验组cyclin D1 在转染后 12h 开始增高,48h 达到高峰并持续高表达,与激光共聚焦显微镜观察实验组蓝色荧光表达量的趋势一致;MTT 实验证实实验组细胞增殖速度(48、72、96h)显著高于对照组(P<0.01);细胞迁移实验表明实验组细胞迁移能力显著高于对照组细胞(P<0.01).结论 cyclin D1的高表达促进了人乳腺癌 MCF-7细胞的增殖和迁移,这可能与其缩短细胞周期、促进DNA合成和复制功能有关.

关键词：乳腺癌、cyclin D1、MCF-7、细胞增殖、迁移

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分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30672363;广西自然科学基金资助项目2010GXNSFC013017;广西医科大学研究生创新课题2010105981001M227

在线出版日期：2012-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：174-178