β-榄香烯诱导人骨肉瘤143B细胞增殖、凋亡及自噬的实验研究

摘要：

目的 探讨β-榄香烯在骨肉瘤中诱导自噬发生的信号通路及其对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法 以不同浓度(0、10、20、50、100、150μg/ml)的β-榄香烯处理人骨肉瘤143B细胞24、48 h后,应用CCK-8法检测细胞存活率;用0、20、50μg/mlβ-榄香烯处理143B细胞48 h后,应用流式细胞仪使用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,并通过荧光显微镜及蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3B)的分布及表达,Western blotting检测143B细胞中丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白表达水平.结果 β-榄香烯呈浓度依赖性地显著抑制骨肉瘤143B细胞的增殖,其对143B细胞24 h和48 h时的半数抑制浓度(IC50)分别为58.89μg/ml和18.48μg/ml;143B细胞经20、50μg/mlβ-榄香烯处理48 h后,细胞凋亡率分别为(15.43±0.99)％和(19.21±0.82)％,明显高于0μg/mlβ-榄香烯组(6.87±1.02)％;且其细胞Cleaved caspase-3蛋白表达水平亦明显高于0μg/mlβ-榄香烯组,差异均有统计学意义(P<0.05);经20、50μg/mlβ-榄香烯处理骨肉瘤143B细胞48 h后,细胞质内的自噬体数量明显增多,其LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平较0μg/mlβ-榄香烯组均明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05),β-榄香烯可以抑制骨肉瘤细胞p-AKT和p-mTOR的表达,且呈时间及剂量依赖性.结论 β-榄香烯可以诱导人骨肉瘤143B细胞增殖抑制及凋亡,还可以通过抑制AKT/mTOR通路激活细胞自噬.

关键词：β-榄香烯、增殖、凋亡、自噬、骨肉瘤细胞

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分类号：R737.33;R394.2;R516.1

资助基金：河北省引进留学人员项目CY201715

在线出版日期：2021-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：267-271