KRAS基因沉默介导MAP K1/MAP K3信号通路对乳头状甲状腺癌上皮间质转化的分子机制研究

摘要：

目的 研究Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)基因沉默介导MAPK1/MAPK3信号通路对乳头状甲状腺癌细胞上皮间质转化的调控机制.方法 收集80例乳头状甲状腺癌组织及相应癌旁组织,免疫组化法分析KRAS蛋白阳性表达率;购买人乳头状甲状腺癌细胞株TPC-1,分为空白组、阴性对照组、siRNA-KRAS组、SCH772984组、茴香霉素(Anisomycin)组、siRNA-KRAS+Anisomycin组,采用qRT-PCR和Western blotting法检测癌组织、癌旁组织和各组细胞中KRAS、C-jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节蛋白激酶1(ERK1)、细胞外信号调节蛋白激酶2(ERK2)、p-JNK、p-ERK1、p-ERK2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)及E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)的mRNA和蛋白表达水平.采用光学显微镜观察各组细胞上皮间质转化状态.结果 癌组织的KRAS阳性表达率高于癌旁组织(63.75％vs.36.25％);与癌旁组织比较,癌组织中E-cadherin表达下调,KRAS、JNK、p-JNK、ERK1、p-ERK1、ERK2、p-ERK2、Vimentin和ZEB1表达上调(均P<0.05).在细胞实验中,沉默KRAS和抑制MAPK1/MAPK3信号通路能够抑制JNK、p-JNK、ERK1、p-ERK1、ERK2、p-ERK2、Vimentin和ZEB1的表达,激活E-cadherin的表达(均P<0.05),同时抑制上皮间质转化.激活MAPK1/MAPK3信号通路能够激活JNK、p-JNK、ERK1、p-ERK1、ERK2、p-ERK2、Vimentin和ZEB1的表达,抑制E-cadherin的表达(均P<0.05),同时激活上皮间质转化.而沉默KRAS表达并Anisomycin处理,可逆转沉默造成的上述功能改变,与空白组和阴性对照组无明显差异.结论 KRAS基因在乳头状甲状腺癌中高表达,沉默KRAS基因能抑制MAPK1/MAPK3信号通路,从而抑制乳头状甲状腺癌的上皮间质转化.

关键词：KRAS基因、MAPK1/MAPK3信号通路、乳头状甲状腺癌、细胞上皮间质转化

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在线出版日期：2020-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：473-479