利用CRISPR/Cas9技术构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株

摘要：

目的 利用CRISPR/Cas9技术敲除SiHa细胞中的卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)基因,构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株.方法 构建sgRNA-FSTL1重组质粒并包装成慢病毒.收集病毒液并感染SiHa细胞,使用嘌呤霉素筛选FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株;采用RT-qPCR和Western blot检测SiHa细胞稳定株FSTL1 mRNA和蛋白的表达情况.结果 FSTL1-sgRNA慢病毒构建成功并筛选出FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株;FSTL1的mRNA和蛋白表达水平在SiHa细胞稳定株中的表达量均比对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 利用CRISPR/Cas9技术成功构建FSTL1基因敲除的SiHa细胞稳定株.

关键词：CRISPR/Cas9、卵泡抑素样蛋白1、基因敲除、SiHa细胞

所属期刊栏目：12

分类号：R331(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81660434

在线出版日期：2019-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：842-846