人胃癌组织定向cDNA文库的构建

摘要：

目的快速构建成人胃癌组织cDNA文库.方法从人胃癌组织分离总RNA,以含有Sfi IB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含Sfi IA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经Sfi I(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN+TE-1000柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTripIEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库.结果经检测共获得2.73×106个重组子,重组率约为94%,插入片段大小平均为1.2 kb.结论用SMART方法构建的胃癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选胃癌相关基因奠定了基础.

关键词：cDNA文库、胃癌、定向克隆

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分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81060201;广西科学研究与技术开发计划项目桂科攻10124001A-22;中国博士后科学基金特别资助项目201003342

在线出版日期：2011-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：394-397