10.3881/j.issn.1000-503X.10941
微小RNA-133b对心肌纤维化的影响
目的 研究微小RNA-133b(miR-133b)对心肌纤维化的影响.方法 选取人心肌成纤维细胞(CFs),采用CCK8检测过表达及敲低miR-133b时细胞增殖情况,qRT-PCR及Western blot检测结缔组织生长因子(CTGF)、 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)的表达水平;生物学软件预测miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告实验证实miR-133b与靶基因的直接调控作用.结果 qRT-PCR检测结果显示,转染miR-133b mimic后miR-133b的表达水平明显高于阴性对照组(t=26.219,P=0.000),转染miR-133b inhibitor后miR-133b的表达水平明显低于阴性对照组(t=6.738,P=0.003).转染CFs 21、45、69、93和117 h后,与阴性对照组相比,miR-133b mimic组CFs增殖能力明显降低,而miR-133b inhibitor组CFs增殖水平明显上升(P均<0.05).与阴性对照组相比,过表达miR-133b后,CTGF(t=9.213,P=0.001;t=8.195,P=0.001)、 α-SMA(t=6.511,P=0.003;t=4.434,P=0.011)、collagenⅠ(t=3.172,P=0.034;t=4.053,P=0.015)及collagenⅢ(t=6.404,P=0.003;t=5.319,P=0.006)的mRNA和蛋白表达水平均明显下调;敲低miR-133b后,CTGF(t=9.439,P=0.001;t=14.100,P=0.000)、α-SMA(t=4.519,P=0.011;t=4.377,P=0.012)、collagenⅠ(t=5.966,P=0.004;t=5.514,P=0.005)及colla-genⅢ(t=4.622,P=0.010;t=4.996,P=0.008)的mRNA和蛋白表达水平均明显上升.共转染miR-133b mimic和WT 3'UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性明显低于共转染mimic control和WT 3'UTR表达载体的细胞(t=5.654,P=0.005),共转染miR-133b mimic和MUT 3'UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性与共转染mimic control和MUT 3'UTR表达载体的细胞差异无统计学意义(t=0.380,P=0.724).结论 miR-133b可能是通过靶向抑制CTGF来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化.
心肌纤维化、微小RNA-133b、结缔组织生长因子
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R542.2+3(心脏、血管（循环系）疾病)
国家自然科学基金 81170294 和陕西省科技统筹创新计划 2014KTCL03-11
2019-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
589-594
