高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

摘要：

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量.方法 将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12).空白对照组给予去离子水喂养,每天以1ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1％乙二醇自由饮水喂养,每天2％氯化铵2ml灌胃.造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较.HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C18(250×4.6 mm,5μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15:85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20℃.结果 大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+ 378730,R2=0.9984和y=7810.5x-16635,R2=0.9967;最低检测浓度为5μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50～2000.00 μg/ml,低浓度线性范围为6.25 ～ 100.00 μg/ml.平均回收率为95.1％,日内及日间精密度分别为3.4％ ～ 10.8％和3.8％ ～9.4％.HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35 ±254.52) μg/ml比(51.56±36.34) μg/ml,(687.35 ±234.53) μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24h尿草酸含量:(11.23 ±4.12) mg比(0.87 ±0.45) mg,(9.89±3.55) mg比(0.77 ±0.65) mg;P均＜0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24h尿草酸含量差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定.

关键词：高效液相色谱法、大鼠模型、尿草酸、含量

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分类号：R692.4(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：湖北省卫计委科研重点项目JX6A09;湖北省医学领军人才培养工程专项经费资助项目 Supported by the Key Research Project of Health and Family Planning Commission of Hubei ProvinceJX6A09;the Hubei Province's Outstanding Medical Academic Leader Program

在线出版日期：2015-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：82-87