微流控芯片技术分析细胞外酸性环境对肿瘤细胞P-糖蛋白表达、活性及其介导的道诺霉素细胞毒性的影响

摘要：

目的 采用微流控芯片技术分析细胞外酸性环境对肿瘤细胞P-糖蛋白(P-gp)表达、活性及其介导的道诺霉素细胞毒性的影响.方法 在微流控芯片上将A549细胞分为实验组和对照组,实验组用pH为6.6酸性细胞培养液处理,对照组用pH为7.4中性培养液常规培养,芯片上进行细胞免疫荧光技术分析P-gp表达,罗丹明123外排实验评价P-gp活性,细胞存活/凋亡荧光染色法分析道诺霉素的细胞毒性.结果 微流控芯片可为A549细胞生长提供适宜的微环境,细胞在72 h后融合度能达到90％以上.酸性细胞培养液处理对P-gp表达未产生显著影响,但可显著增强P-gp活性,处理时间6h时A549细胞P-gp活性达到峰值.酸性细胞培养液处理6h后道诺霉素细胞毒性效率显著降低,在P-gp抑制剂维拉帕米协同作用下道诺霉素细胞毒性得到逆转.结论 微流控芯片技术可缩短分析时间,降低试剂耗量,为进一步认识肿瘤多药耐药机制和高效肿瘤耐药逆转剂筛选提供新的技术平台.

关键词：多药耐药、酸性细胞外环境、P-糖蛋白、微流控芯片、细胞毒性

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分类号：R-331;R73-3(医学研究方法)

资助基金：重庆市自然科学基金面上项目cstc2012jjA10046.重庆市卫生局医学科研计划项目2012-2-165;重庆市永川区科技计划项目YC-STC,2012BE5002 Supported by the Natural Science Foundation Project of CQ CSTCcstc2012jjA10046;the Medical Science Research Project of Chongqing Health Bureau2012-2-165;the District Science and Technology Projects of YongchuanYCSTC,2012BE5002

在线出版日期：2015-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：75-81