10.3881/j.issn.1000-503X.2013.06.006
重组人白细胞介素-35的真核表达及生物活性
目的 构建重组人白细胞介素-35[rhIL-35-IgG1(Fc)]蛋白的真核表达载体并表达纯化该蛋白,研究IL-35与其受体糖蛋白130(gp130)的结合作用.方法 构建IL-35真核表达载体pSTEP2-IL35-LFc,转染到HEK293T细胞中,采用亲和色谱分离纯化获得重组IL-35蛋白,SDS-PAGE及Western blot法鉴定蛋白表达,ELISA法检测IL-35-Fc与其受体链gp130的结合作用,并在M1小鼠白血病细胞上研究IL-35对gp130的生物学作用.结果 获得高纯度的人IL-35-Fc重组蛋白,ELISA法检测结果发现IL-35-Fc与其受体链gp130具有结合作用,并且IL-35在M1小鼠白血病细胞上对gp130具有中和作用.结论 成功制备了具有生物活性的人IL-35-IgG1(Fc)重组蛋白,发现IL-35能够与其受体链gp130的结合,在M1小鼠白血病细胞上对gp130也具有中和作用.
重组人白细胞介素-35、糖蛋白130、M1小鼠白血病细胞
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Q78(基因工程(遗传工程))
十二五"重大新药创制"科技重大专项2011ZX09506-003
2014-02-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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