无需逆转录的高通量多重呼吸道病毒RNA检测技术的建立

摘要：

目的 建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段.方法 直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以Luminex微球为基础的多指标同步分析(xMAP)多重检测平台,对一个样品同时检测A和B型流感病毒、A和B型呼吸道合胞病毒、1、2和3型副流感病毒,及偏肺病毒等8种病毒的靶标RNA,可一次实验并行检测96个样品.对该高通量检测系统进行了特异性、灵敏度评价.结果 该检测方法可以特异性区分8种病毒的RNA靶标分子,检测下限均低于或等于4695个RNA拷贝.结论 初步建立了可靠、灵敏、操作简便、高通量的多种呼吸道病毒RNA并行检测方法,为进一步实现在临床呼吸道样品中高通量检测呼吸道病毒提供了技术基础.

关键词：呼吸道病毒、体外转录RNA、多指标同步分析技术、信号放大

所属期刊栏目：35

分类号：R-331(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金30872412

在线出版日期：2013-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：24-28