蛋白连接组织生长因子表达腺病毒的构建及其基因功能

摘要：

目的 构建及鉴定蛋白连接组织生长因子(CTGF)基因过表达腺病毒,初步探究CTGF在糖脂代谢方面的功能.方法 克隆CTGF过表达质粒,定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV,PmeⅠ酶切线性化穿梭质粒转化改造的E.coliBJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌产生重组腺病毒载体,用PacⅠ线性化重组质粒,回收转染293A细胞包装病毒颗粒,经过3轮扩增,感染肝原代细胞,观察感染效率及检测基因表达情况.通过对小鼠不同时间段的饥饿处理,提取肝脏RNA做RT-PCR,实时定量PCR检测CTGF基因在不同营养条件下的变化情况.结果 成功包装CTGF的腺病毒,感染效率达90％以上.CTGF在不同营养条件下表达情况不同,并且与糖脂代谢重要基因过氧化物酶体增值激活受体γ共激活因子1α表达情况一致.饥饿24h,CTGF上调(3.38±0.51)倍；饥饿48h,CTGF上调(5.26±1.25)倍(P＜0.05).结论 初步认定CTGF可能参与糖脂代谢.

关键词：蛋白连接组织生长因子、过表达、腺病毒、饥饿

所属期刊栏目：33

分类号：Q591.4

资助基金：国家重点基础研究发展计划项目973计划2011CB504004

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：649-653