10.3881/j.issn.1000-503X.2011.04.001
噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽
目的 用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽.方法 采用酶联免疫吸附测定法(EUSA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性.结果 经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列.序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列.MTT法测定结果表明,合成的4个小肽均能促进UT-7细胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明显.结论 获得4个具有较高hSCF生物学活性的模拟肽.
噬菌体表面展示文库、人干细胞因子、模拟肽、筛选、酶联免疫吸附测定法
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R542.220.5(心脏、血管(循环系)疾病)
国家高技术研究发展计划项目863项目2003AAZ3360 Supported by the National High Technology Research and Development Program of China 863 Program2003AAZ3360;第一、二位作者对本文贡献一致The fast two authors contributed equally to this article
2011-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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