纳洛酮对离体人脑神经元缺氧损伤干细胞因子和受体表达的影响

摘要：

目的 通过检测神经元细胞内干细胞因子(SCF)及其受体c-kit(c-kitR)mRNA表达量的变化探讨纳洛酮对人胚胎大脑神经元缺氧损伤的影响.方法 应用无血清方法原代培养人胚胎大脑神经元,于第10天对神经元进行缺氧结合无糖处理.将24孔培养板细胞随机分为4组:对照组(按照正常培养条件同期培养)、单纯缺氧组(缺氧无糖处理0.5h)、纳洛酮0.5组(纳洛酮0.5μg/ml+缺氧无糖处理0.5 h)、纳洛酮10组(纳洛酮10μg/ml+缺氧无糖处理0.5 h).分别于复氧24 h后测定细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)浓度,并应用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞存活情况.将25 ml培养瓶按上述方法分组,分别于缺氧前、缺氧后即刻、复氧3、6、12和24 h提取细胞内总RNA,应用逆转录聚合酶链反应扩增后,检测SCF和c-kitR mRNA表达量的变化.结果 单纯缺氧组细胞MTT值显著低于对照组(P<0.01),纳洛酮0.5组MTT值显著低于对照组,与单纯缺氧组比较差异无显著性,络洛酮10组MTT升高至对照组水平(P>0.05);单纯缺氧组细胞外液LDH浓度显著高于对照组(P<0.05),纳洛酮0.5组与对照组和单纯缺氧组比较差异均无显著性(P>0.05),络洛酮10组细胞外液LDH浓度降至对照组水平(P>0.05);缺氧后即刻,可见SCF/c-kitR mRNA表达量显著升高(P<0.01),其中SCF表达量在24 h内呈双峰分布;给予不同浓度纳洛酮后,随药物浓度的增加,各组表达量峰值降低,并且延迟出现,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01).结论 SCF/c-kitR mRNA 在神经元缺氧后早期即表达增高.纳洛酮可以减轻细胞损伤,并可调节SCF/c-kitR的表达.纳洛酮对细胞损伤的保护作用可能涉及对某些细胞因子表达的调控.

关键词：神经元、缺氧、纳洛酮、干细胞因子、c-kit受体

所属期刊栏目：32

分类号：R969(药理学)

在线出版日期：2010-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：215-221,后插二