ShcD通过PTB和SH2结构域和TrkC受体相互作用

摘要：

目的 探讨ShcD与TrkC的相互作用,以深入认识TrkC下游信号转导的分子机制.方法 利用酵母双杂交技术,将TrkC及TrkC各种突变体的胞内区分别克隆到酵母质粒pAS2-1中,将ShcD及ShcD的4个结构域(CH2、PTB、CH1和SH2结构域)分别克隆到酵母质粒pACT2中,将它们分别共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测它们之间的相互作用.将TrkC克隆进pmRFP载体(带红色荧光蛋白),ShcD克隆进pEGFP载体(带绿色荧光蛋白),并将pmRFP-TrkC和pEGFP-ShcD共转染至293T细胞中,采用荧光共聚焦显微镜观察其定位情况.结果 ShcD可以和TrkC但不能和激酶失活突变体TrkCM1(K572A)结合;PTB和SH2结构域均可以与TrkC受体结合并且PTB结构域结合于TrkC的 NPQY模体;ShcD和TrkC在293T细胞中共同定位于胞膜和胞浆中.结论 ShcD通过PTB和SH2结构域以依赖于受体激酶活性的方式结合TrkC.

关键词：ShcD、TrkC、PTB、SH2、共定位

所属期刊栏目：31

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划项目973计划2004CB518604

在线出版日期：2010-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：720-723,797