10.3321/j.issn:1000-503X.2008.03.008
MiR-9在人神经胶质瘤中调节CBX7的表达
目的 检测CBX7在人神经胶质瘤中的表达,研究人神经胶质瘤中异常表达的microRNA对CBX7的可能调控作用.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测2例正常脑组织、9例胶质瘤组织和3株胶质瘤细胞系中CBX7 mRNA和蛋白水平的表达变化.结合Miranda和改良的机器学习法预测调控CBX7的miRNA.采用real-time PCR检测上述组织和细胞系中miR-9的表达,然后在细胞中过表达或敲低miR-9,结合荧光素酶实验和Western blot检测miR-9对CBX7表达的影响.采用MTT实验和流式细胞术分析miR-9敲低后对T98G细胞生长的影响.结果 在胶质瘤组织和细胞系中,CBX7的mRNA水平改变不明显,而蛋白水平却明显下调.生物信息学预测CBX7可能受包括miR-9在内的多个miRNAs调控.与正常组织相比,miR-9在胶质瘤中表达明显增高.在293ET细胞中,过表达miR-9能抑制CBX7-3'UTR报告基因活性.在T98G细胞中,敲低miR-9可增加CBX7-3'UTR报告基因活性,对内源性CBX7的mRNA水平无明显影响,但使CBX7蛋白表达增加.敲低miR-9后,T98G存活细胞数增加,而且G1期细胞数比对照组明显减少.结论 由于受到miR-9转录后水平的抑制,CBX7在人神经胶质瘤中表达下调甚至缺失.
miR-9、CBX7、神经胶质瘤、基因表达
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R739.41;Q291(肿瘤学)
国家自然科学基金90608022;国家高技术研究发展计划项目863计划2006AA02Z137;国家重点基础研究发展计划项目973计划
2008-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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