密码子优化的HPV16 L2E7基因在大肠杆菌中高效表达
目的 提高HPV16 L2E7融合基因在大肠杆菌中的表达水平,为中试研究提供高表达量的疫苗候选株.方法 根据大肠杆菌偏爱密码子,利用Synthetic Gene Designer软件对L2E7全基因进行密码子优化,将分段合成的基因分部插入到pET9a中,经酶切和测序鉴定无误后转化BL21(DE3+)中,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.表达的融合蛋白进行SDS-PAGE胶和Western blot鉴定.同时还进行梯度实验分别对诱导的温度、时间和IPTG诱导时菌体浓度进行优化,并对蛋白的纯化方案进行摸索.结果 优化后的pET9aSL2E7AB在大肠杆菌中得到高效表达,诱导条件优化后的目的蛋白占全菌60%左右.结论 成功得到了具有较高表达水平的疫苗候选株.
人乳头瘤病毒、密码子优化、疫苗、大肠杆菌
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R373;Q784(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家高技术研究发展计划863计划2002AA216041
2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
579-583
