壳聚糖修饰对细胞摄入和细胞毒性的影响
目的 研究精氨酸或十六烷基修饰壳聚糖对其细胞摄入和细胞毒性的影响及作用机制.方法 用α-32P-dATP标记质粒DNA,分别与十六烷基化壳聚糖和精氨酸修饰的壳聚糖通过复凝聚方法形成壳聚糖DNA纳米复合物.采用血管平滑肌A10细胞进行摄入测试,并用β液闪计数仪检测结果.用MTT方法对壳聚糖DNA纳米复合物的细胞毒性进行评价.结果 经32P标记的DNA与不同修饰的壳聚糖复合所形成的纳米复合物粒径约为55.9~174.9 nm,zeta电位约为1.8~10.8 mV.细胞摄入实验显示通过精氨酸或十六烷基修饰的壳聚糖与DNA形成的纳米复合物更易于进入细胞.其中十六烷基化壳聚糖DNA纳米复合物(HCNC)在N/P为1∶1时细胞摄入量最高,精氨酸修饰的壳聚糖DNA纳米复合物(ACNC)细胞摄入次之,与未经修饰的壳聚糖DNA纳米复合物(UCNC)相比,差异具有显著性(HCNC、ACNC比UCNC高1.3倍,P<0.05).细胞毒性实验显示,修饰后的壳聚糖纳米复合物的毒性远远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine 2000.结论 两种修饰对壳聚糖DNA纳米复合物的血管平滑肌细胞摄入有明显促进作用,其作用机制各不相同;同时其细胞毒性远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine 2000.
壳聚糖、化学修饰、纳米复合物、细胞摄入、细胞毒性
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R318.08;Q28(医用一般科学)
国家自然科学基金30070221;50233020;科技部专项基金2005DIB1J094;天津市自然科学基金05YFJMJC10200
2006-09-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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