抗人趋化素样因子1羧基端多肽抗体的制备、鉴定及组织芯片分析
目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体.经ELISA法测定抗体效价,Western-blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应,组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合.结果抗CKLF1 C端多肽抗体的效价为10-4,能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKLF1蛋白,也可与多种组织中天然表达的CKLFs发生特异性反应,在正常支气管软骨、胃粘膜和平滑肌中呈阳性表达,在正常直肠和高分化直肠癌的腺上皮中呈强阳性表达,而在低分化的直肠癌中为阴性.结论抗CKLF1多克隆抗体效价高,亲和力强,可用于CKLF1的检测和研究.
趋化素样因子1、抗多肽抗体、组织芯片
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R392.11
国家高技术研究发展计划863计划2001AA215061,2002BA711A01;全国高等学校优秀博士学位论文作者专项基金200257
2005-01-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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