手工组织显微切割食管癌不同病变阶段细胞提取高质量RNA

摘要：

目的建立手工组织显微切割方法准确挖取食管癌不同病变阶段细胞,从中提取高质量RNA,以满足后续基因表达分析的需要.方法常规制备冰冻组织切片,用无水乙醇一次性脱水固定,显微镜下用1 ml注射器针头从组织冰冻切片中分别挖取不同病变阶段的细胞,用TRIzol提取总RNA.结果手工挖取面积可准确到1/25 mm2,从挖取的细胞中提取出高质量的总RNA,凝胶电泳分析见清晰的18S和28S rRNA带,可满足后续分子水平研究的要求.结论无水乙醇固定冰冻组织切片可有效保存RNA的完整性,手工组织显微切割能够准确挖取小至1/25 mm2面积的细胞,方法简单、易掌握、易操作,不须特殊仪器设备,适合在一般实验室推广应用.

关键词：手工组织显微切割、食管癌、RNA提取

所属期刊栏目：25

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：广东省自然科学基金000819;教育部留学回国人员科研启动基金外教司[2001]345号;汕头大学校科研和教改项目L00007

在线出版日期：2004-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：659-663