应用酵母双杂交技术研究人睾丸特异表达基因HSD-3.8的功能

摘要：

目的探寻本实验室筛选出的与不孕症相关的人睾丸特异表达基因HSD-3.8(GenBank接收号为AF311312,国际上命名为精子相关抗原1)编码蛋白质的作用配体,揭示其参与受精过程的机制.方法采用酵母双杂交体系,构建含有HSD-3.8基因部分序列(HSD-0.7)的诱饵质粒,筛选人卵巢cDNA文库.在获得阳性克隆后,根据蛋白质结构分析并结合PCR方法重新构建一系列缺失体,在酵母体内验证它们与被捕获的蛋白因子之间的结合.结果酵母双杂交实验获得一阳性克隆,其编码氨基酸与人G蛋白β1亚基羧基端的144个氨基酸同源性为100%.所构建的几种诱饵蛋白缺失体在酵母体内均不能与该捕获的蛋白因子相互作用.结论 HSD-3.8编码蛋白质片段HSD-0.7可能通过G蛋白信号转导途径在受精过程中发挥功能,与G蛋白β1亚基的结合有赖于其结构的完整.

关键词：酵母双杂交、TPR P-loop G蛋白

所属期刊栏目：24

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家科技重点项目2002BA711A01;国家重点基础研究发展计划973计划G1999055901;国家高技术研究发展计划863计划2001AA221131

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：582-587