CTLA-4在大肠杆菌中的克隆和表达
目的在原核表达系统大肠杆菌中表达具有生物活性的人毒性T淋巴细胞相关蛋白-4可溶性部分(human soluble CTLA-4)。方法 PCR扩增获得CTLA-4编码基因,利用表达载体pGEX-2T构建重组质粒2TC,在BL21(DE3)宿主菌中表达。观察不同IPTG浓度及诱导时间对蛋白表达的影响并测定其免疫活性。结果 PCR扩增所获DNA片段与文献报道CTLA-4序列一致。在重组大肠杆菌中0.10 mmol/LIPTG诱导4 h可大量生成相对分子质量40000的GST-CTLA4融合蛋白。Western blot分析表明原核表达产物CTLA-4具抗原抗体结合活性。结论hsCTLA-4可在原核表达系统中表达并具有免疫活性。
CTLA-4基因克隆原核表达
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Q785(基因工程(遗传工程))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
154-157