人甲胎蛋白基因转录调控元件的改造
目的为构建高效利用甲胎蛋白(AFP)基因转录调控元件(TREs),驱动治疗基因在肝癌细胞中特异性表达的基因治疗载体,对天然人AFP TREs进行改建和鉴定.方法采用亚克隆技术,删除了天然人AFP TREs中含有沉默子活性的-0.87～-3.06kb区域,将具有增强子活性的-3.06～-5.1kb片段和调控AFP基因表达的启动子"核心"区域+29～-870 bp片段连接,获得经人工改造后的基因转录调控元件,命名为AFP(e/p)TREs.用报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)表达法测定TREs的活性和特异性.结果AFP(e/p)TREs在人肝癌细胞FepG2中的活性是天然人AFP TREs的1.8倍,并只能使CAT基因在AFP阳性的HepG2细胞中表达而不在喉癌Hep2细胞中表达.结论改建后的AFP(e/p)TREs较天然的人AFP TREs长度缩短,具有更高的活性并仍具有肝癌细胞特异性,适合用于肝癌特异性表达基因治疗载体的构建.
甲胎蛋白、基因转录调控、基因治疗、载体
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R459.9(治疗学)
中国医学科学院/中国协和医科大学校科研和教改项目;中国协和医科大学校科研和教改项目
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
114-120
