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质粒构象对转染后蛋白表达时间曲线的影响

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目的 探讨质粒的不同构象下磷酸钙转染后对蛋白表达量时间曲线的影响.方法 经过处理的pcDNA3 - MADCAM -1 - Fc,pcDNA3.1/Hygro(+)- Alpha4,pcDNA3.1/Hygro(+)- Beta7三种质粒磷酸钙转染293T细胞,第一种表达分泌到胞外的蛋白通过收集上清,ProteinA纯化,另外两种表达于细胞外膜,通过流式细胞仪检测荧光强度.结果 pcDNA3 - MADCAM -1 - Fc磷酸钙转染后处理组(缺口开环)比对照组表达蛋白量多(t =5.009,p=0.0376).pcDNA3.1/Hygro(+)- Alpha4,pcDNA3.1/Hygro(+)- Beta7两种质粒共转后处理组荧光强度36h后略高于对照组,48h后对照组明显升高.结论 质粒的不同构象下磷酸钙转染后蛋白表达量有时间依赖性.

质粒构象、碱裂解法、转染、缺口开环、荧光强度

20

R394

河南省科技厅自然科学研究项目0611043400

2012-07-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

4-5,10

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